超微量分光光度计在核酸定量和分析中的应用: 分光光度测定法是一项定量和分析生物成分的成熟技术。其中,核酸是生物实验室**常检测的生物成分之一。确定这些样品的浓度和纯度对许多下游实验至关重要。 核酸主要吸收260nm下的紫外光,其浓度可以应用朗伯比尔定律通过它们的相关消光系数和样品光程计算出来。 首先,260nm的紫外光直接照射样品,北京性能稳定超微量分光光度计探针检测,北京性能稳定超微量分光光度计探针检测,北京性能稳定超微量分光光度计探针检测,并且穿过样品,而另一边的光电检测器则测定有多少光被吸收。通过对照参比(一般是样品稀释液),可以定量样品中的核酸浓度。 朗伯一比尔(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依据的基本原理。北京性能稳定超微量分光光度计探针检测
超微量分光光度计检测蛋白A280:
蛋白和核酸不一样,具有很强的多样性。Protein A280功能应用于检测那些含有Trp、Tyr残基或者含有Cys-Cys二硫键的纯蛋白,这些蛋白在280nm吸光度明显。Protein A280功能不需要构建标准曲线,而是检测吸光度后,直接计算蛋白浓度。
Protein A280显示紫外吸收光谱,检测280nm处的吸光度后计算浓度(mg/ml)。和核酸检测一样,Protein A280记录显示的是10mm光程下的数据。
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山东操作简便超微量分光光度计核酸检测测试只在可见光区有吸收的样品时使用玻璃比色皿。
Micro Drop为一款全波长(185~910nm)超微量紫外可见分光光度计,不仅提供了便于测量小剂量样本的基座模式,也可以使用传统的比色皿来进行样本检测。 基座模式下,本产品可以检测0.5-2μl的样本,而且检测具有非常高的准确性和重复性。使用基座模式检测样本时,样本保留系统应用了表面张力来把样本保留在两根检测光纤中间,这使得仪器可以检测较高浓度的样本而不用稀释,测量浓度范围可达普通分光光度计检测浓度范围的200倍,且可实时调控光纤之间的液柱高度,以获得更准确的检测数据。相对于传统的比色皿检测方法,基座模式免去了复杂的比色皿清洗过程,只需使用无尘纸擦拭,清理简便。另外,对于浓度低、易挥发或者表面张力比较低不易形成液柱的样品,可以使用比色皿进行测量。 开机后,按钮亮起并持续保持光亮,在检测过程中,按钮指示灯会闪烁表示仪器正在运行中。本产品无需预热,即可直接进行测量,操作简单,快捷,且软件可以直接给出浓度值。此外,本产品体积小,质量轻,便于携带。
荧光分光光度计和紫外可见分光光度计是实验室常用的光学仪器。 主要区别如下: 1、荧光分光光度计有两个单色器,而一般紫外可见分光光度计只有一个单色器。 2、荧光分光光度计的光源和检测器是成直角分布的,而紫外可见分光光度计是成一条直线的。 3、荧光分光光度计是以氙灯做为光源,而紫外可见分光光度计是以氘灯作为紫外区光源,钨灯或卤钨灯作为可见光区的光源。 4、荧光分光光度计的比色皿是四壁均为光学面,而紫外可见分光光度计*为两面为光学面。 Lowry法的原理是蛋白质与Cu2+反应,产生蓝色的反应物。
A260:是核酸比较高吸收峰的吸收波长,比较好测量值的范围为0.1至1.0。如果不在此范围,稀释或浓缩样品,使之在此范围内;如果吸光度小于0.05,检查是否存 在操作因素(如移液不准确,样品内有悬浮物等)影响。DNA样品的A260 吸光度值是否>0.1。(请注意,这个值跟仪器无关,核酸的吸光度必需大于0.1,其值才有效和可靠,因为样品中的杂质和颗粒这些不纯物的干扰通常 会对光有一定吸收,其值<0.1); A280:是蛋白比较高吸收峰的吸收波长. A230:是碳水化合物比较高吸收峰的吸收波长: A260/A280:是核酸纯度的指示值。纯度好的DNA或RNA,在pH7-8.5 下A260 / A280的比值应该在2.0 或2.5。 纯净的样品比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。 A260/A230:纯DNA和 RNA的A260/A230比值为2.5。若比值小于2.0标明样品被碳水化合物(糖类)、盐类或有机溶剂污染,需要纯化样品。 Micro Drop为一款全波长(185~910nm)超微量紫外可见分光光度计。山东操作简便超微量分光光度计核酸检测
核酸的较高吸收峰的吸收波长260nm。北京性能稳定超微量分光光度计探针检测
Micro Drop基座检测空白循环: 我们建议把空白对照当成样品来检测,这样可以确认仪器性能完好并且基座上没有样品残留,按下列操作来运行空白循环: 1. 软件中打开将进行的操作模式,把空白对照加到基座上,并把样品臂放下。 2. 点击空白检测来进行空白对照检测并保存参比图谱。 3. 重新加空白对照到基座上,把它当成样品一样来检测,点击检测,结果应该是差不多为一水平线,吸光 值变化应不超过0.04A(10mm光程)。 4. 擦去上下基座上的液体,重新进行上面的操作,直到检测光谱图的变化不超过0.04A(10mm光程)。 虽然不需要在每个样品之间进行空白检测,但我们建议在检测多个样品时,比较好每30min进行一次空白检测。 北京性能稳定超微量分光光度计探针检测
上海宝予德科学仪器有限公司是一家生产型类企业,积极探索行业发展,努力实现产品创新。公司致力于为客户提供安全、质量有保证的良好产品及服务,是一家有限责任公司(自然)企业。公司业务涵盖移液器,吸头,酶标仪,分光光度计,价格合理,品质有保证,深受广大客户的欢迎。宝予德自成立以来,一直坚持走正规化、专业化路线,得到了广大客户及社会各界的普遍认可与大力支持。
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